Kollajen Asit Ekstraksiyonu

Jul 20, 2022 Mesaj bırakın

Asit ekstraksiyonu, belirli koşullar altında, özellikle moleküller arası tuz bağlarını ve Schiff bazlarını yok etmek ve lif şişmesine ve çözünmesine neden olmak için düşük iyon konsantrasyonlu asidik koşullar kullanarak, belirli koşullar altında kollajeni çıkarmak için belirli bir asit çözeltisi konsantrasyonu kullanmaktır. Asit yöntemiyle ekstrakte edilen kollajen genellikle asitte çözünür kollajen haline gelir. Asit çözme yöntemi, kolajen moleküllerini çapraz bağlama olmadan çözebilir ve ayrıca aldimin çapraz bağlama bağları içeren kolajen liflerini çözebilir ve daha sonra bunları çözücüye bırakabilir. Asit yöntemi, kolajeni çıkarmak için nispeten yaygın ve etkili bir yöntemdir. Düşük sıcaklıkta asit yöntemi ile ekstrakte edilen kolajen, üçlü sarmal yapısını büyük ölçüde korur ve tıbbi biyolojik malzeme ve hammaddelerin hazırlanması için uygundur. Genel uygulama, belirli bir malzeme-sıvı oranına göre ön işleme tabi tutulmuş kemik unuya uygun bir konsantrasyonda asit çözeltisi eklemek ve belirli bir süre boyunca 0-25 derecede karıştırıp özütlemek. Kollajeni çıkarmak için asit yöntemini kullanırken, kolajenin biyolojik aktivitesinin tahribatını önlemek için ekstraksiyon sıcaklığının çok yüksek olmaması gerektiğine dikkat edilmelidir. Örnekleme ve ön muameleden sonra homojenat, düşük sıcaklıkta asit ile ekstre edildi ve asitte çözünür kolajen (ASC) elde etmek için santrifüjlendi. Çözücü olarak kullanılan asitler esas olarak hidroklorik asit, fosforik asit, formik asit, asetik asit, malik asit, sitrik asit vb. içerir, ancak çoğu çalışma asetik asit ekstraksiyonuna odaklanır. Örneğin, Maria Sadowska ve ark. oda sıcaklığındaki proteinde kollajeni çıkarmak için 0.5mol/L sitrik asit kullandı, ekstraksiyon hızı asetik asit ekstraksiyonundan biraz daha düşük. Sitrik asit renk ve koku üretmediği için gıda endüstrisinde kolajen ekstraksiyonunda yaygın olarak kullanılmaktadır.

Asit muamelesi sırasında reaksiyon kuvvetlidir, hidroliz tamamlanır ve çoğunlukla amino asit karışımı üretilir. Asit ekstraksiyonu kullanıldığında, asit konsantrasyonuna, hidroliz sıcaklığına, hidroliz süresine ve diğer koşullara bağlı olarak, eşit olmayan moleküler ağırlığa sahip kolajen hidrolizatı elde edilebilir. Bununla birlikte, triptofan yok edilecek, serin ve tirozin de kısmen yok edilecek ve orta asit konsantrasyonunun tam hidrolizi sırasında ekipman ciddi şekilde korozyona uğrayacaktır. Bu nedenle, asit yöntemi ile biyomedikal kollajen çözünmesi için asitlik, sıcaklık, zaman ve diğer etkileyen faktörler doğru bir şekilde kontrol edilmelidir. Çeşitli eksiklikler nedeniyle asit yöntemi nadiren tek başına kullanılır ve genellikle enzimatik yöntem ile birleştirilir. Örneğin, ham madde olarak domuz derisi kullanılarak, sitrik asit (pH8.6) ve pepsin sinerjisi altında kolajen özütlenir. Tedavi edilen domuz derisine bir süre 0.05moL/L sitrik asit solüsyonu (pH 2.5-3) ekleyin ve ardından son ekstraksiyon oranı olan NaCl ile tuzlayın. yüzde 12.35'tir ve ekstrakt, üç ipliği sağlam tutar Tip I kollajenin sarmal yapısı. Diğerleri hammadde olarak civciv sternal kıkırdağını kullanmış, 0.5moL/L asetik asit koşulu altında pepsin ile defalarca sindirilmiş, 4 derecede ve 20000r'de 20 dakika santrifüjlenmiş ve son olarak iyon değişimi için DEAE-Sephadex A-50 uygulamıştır. kromatografiye tabi tutuldu ve daha sonra diyaliz edildi ve daha sonra NaCl ile tuzlandı ve son olarak saflaştırılmış kolajen tip II elde edildi.



2

Soruşturma göndermek

whatsapp

Telefon

E-posta

Sorgulama